Elektroforese & Lengtebepaling DNA-fragmenten

Productomschrijving

Restrictie-enzymen zijn enzymen die in staat zijn om DNA-moleculen op zeer specifieke plaatsen te splitsen of te knippen op basis van de basenvolgorde van het DNA-molecuul. Hun ontdekking en isolatie in de tweede helft van de 20e eeuw verschaften wetenschappers een instrument van onschatbare waarde en dit breidde zich snel uit op het gebied van moleculaire biologie.

Agarose-elektroforese is een techniek voor het scheiden van de stukjes DNA die ontstaan ​​door het gebruik van restrictie-enzymen. In deze activiteit zullen studenten agarose-elektroforese uitvoeren op drie DNA-monsters die al zijn behandeld met restrictie-enzymen. Eén monster is geknipt met het enzym HindIII, één is geknipt met het enzym EcoRI en één is geknipt met beide enzymen. Het resulterende patroon van DNA-banden op de agarosegel zal laten zien dat elk enzym het DNA anders beïnvloedt.

Studenten leren niet alleen over het proces van DNA-elektroforese, maar leren de technieken die bij het proces horen, zoals het opzetten van een agarosegel, het laden van DNA-monsters in de agarosegel en het kleuren van de gel om de DNA-banden te visualiseren. Ze zullen ook leren hoe ze de grootte van onbekende DNA-fragmenten kunnen bepalen nadat ze hun resultaten hebben onderzocht.

De set bevat speciaal behandelde DNA-monsters die niet hoeven te worden gekoeld of ingevroren, geprepareerde agarose die eenvoudig kan worden gesmolten in een heetwaterbad of magnetron, TBE-elektroforesebuffer en DNA-kleuring. Er is genoeg DNA om 10 gels te laten lopen.

Pakket bevat:

• 200 ml bereide agarose, 0,8% oplossing
• 500 ml Tris-boraat ETA-buffer, 5X
• 60 ml DNA-kleuring, 20X
• 100 µL Lambda DNA/EcoRI Digest met laadkleurstof
• 100 µL Lambda DNA/HindIII Digest met laadkleurstof
• 100 µL Lambda DNA/EcoRI,HindIII Digest met laadkleurstof

Nodig maar niet meegeleverd zijn agarose-elektroforesekamers, voedingen en micropipetten die 10 µL kunnen meten.